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http://hdl.handle.net/11422/27115
| Type: | Trabalho de conclusão de graduação |
| Title: | Adesão de Fusobacterium nucleatum a moléculas da matriz extracelular |
| Author(s)/Inventor(s): | Correia, Júlia Morgado Caldas |
| Advisor: | Lobo, Leandro Araújo |
| Co-advisor: | Marre, Andressa Temperine de Oliveira |
| Abstract: | Fusobacterium nucleatum é uma bactéria anaeróbia estrita, gram-negativa, que se apresenta como um bacilo delgado de extremidades fusiformes. É um microrganismo comensal encontrado, majoritariamente, na cavidade bucal e, em menores quantidades, no trato intestinal. No entanto, também é reconhecido como um patógeno de importância por sua associação com o desenvolvimento de doenças inflamatórias orais como gengivite e periodontite, e por sua forte correlação com doenças extraorais de maior gravidade, como câncer colorretal. Por ser capaz de colonizar e causar patologias em ambos os sítios, o projeto dispõe-se a avaliar a capacidade de adesão de Fusobacterium nucleatum (ATCC 25586) a proteínas da matriz extracelular humana (MEC), a identificar proteínas bacterianas que promovem tal adesão, além de estudar as capacidades de translocação na MEC e formação de biofilme pela espécie. Para alcançar tais objetivos realizaram-se ensaios de adesão a proteínas da MEC (colágeno tipo I, fibronectina e laminina) imobilizadas em lamínulas de vidro e a visualização da aderência foi feita por microscopia de campo claro. Ademais, foram realizados ensaios de biofilme na presença e ausência do Matrigel em placas de 96 poços para análise da produção de biofilme por espectrofotometria. Este mesmo experimento também foi conduzido em placas de 24 poços com lamínulas de vidro para análise por microscopia de varredura. Realizou-se também a extração de proteínas de membrana externa (PMEs), para o isolamento de potenciais adesinas, analisadas em equipamento ESI-Q-TOF. Por fim, foram realizados ensaios de translocação no Matrigel empregando insertos Transwell acondicionados em placas de 24 poços. Os resultados obtidos demonstram que Fusobacterium nucleatum é dotado da capacidade de aderir às três proteínas utilizadas, sendo observada uma maior aderência ao colágeno e à fibronectina, o que sugere um número reduzido de adesinas específicas à laminina. Ambos os experimentos de biofilme revelam que a espécie é uma boa produtora, havendo a formação de biofilmes consistentes em ambas as condições testadas, porém com algumas diferenças na sua arquitetura quando na presença do Matrigel. Análise e caracterização das PMEs por espectrometria de massas, bioinformática e proteômica permitiram a identificação de 12 proteínas que promovem adesão ao colágeno tipo I, incluindo as adesinas FadA, FomA e RadD, que ganham função de MSCRAMMs. Em última análise, F. nucleatum demonstrou potencial de translocação na matriz extracelular, uma vez que placas inoculadas logo após as primeiras 24 horas de interação com o Matrigel apresentaram crescimento confluente, indicando que a bactéria foi capaz de atravessar a camada de matriz. A partir dos resultados, conclui-se que F. nucleatum com adesinas específicas a proteínas da MEC e que essas constituem importantes fatores de virulência da espécie, contribuindo para processos de formação de biofilme e translocação bacteriana. |
| Keywords: | Matriz extracelular Extracellular matrix Fusobacterium nucleatum |
| Subject CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA |
| Production unit: | Instituto de Microbiologia Paulo de Góes |
| Publisher: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
| Issue Date: | 6-Jun-2025 |
| Publisher country: | Brasil |
| Language: | por |
| Right access: | Acesso Aberto |
| Citation: | CORREIA, J. M. C. (2025). Adesão de Fusobacterium nucleatum a moléculas da matriz extracelular [Trabalho de Conclusão de Curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon. |
| Appears in Collections: | Ciências Biológicas - Microbiologia e Imunologia |
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