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http://hdl.handle.net/11422/20288| Type: | Trabalho de conclusão de graduação |
| Title: | Implementação da técnica de imunofluorescência indireta para detecção de IgG anti-ZIKV e anti-DENV |
| Author(s)/Inventor(s): | Monteiro, Fábio Luís Lima |
| Advisor: | Aguiar, Renato Santana |
| Co-advisor: | Higa, Luiza Mendonça |
| Abstract: | Embora a infecção pelo vírus Zika (ZIKV) tenha sido, por muitos anos, associada a pequenos surtos de quadros febris brandos e inespecíficos, atualmente o virus ZIKV emerge como um grave problema de saúde pública, visto sua associação a neuropatias e a casos de malformações congênitas em infantes cujas mães foram infectadas durante a gestação, além de sua expansão mundial. Durante o pico da epidemia de ZIKV no Brasil, o Ministério da Saúde não dispunha de testes sorológicos específicos para ZIKV, dificultando o diagnóstico laboratorial. Além disso, a janela de detecção do RNA viral no sangue e na urina é curta, limitando-se às primeiras semanas de infecção. Este fato ressaltou a importância do desenvolvimento de melhores técnicas de diagnóstico sorológico específico para ZIKV, sobretudo após a fase aguda da infecção. Um limitante no diagnóstico sorológico para ZIKV é a reatividade cruzada com anticorpos anti-vírus da dengue (DENV), visto que estes vírus são semelhantes antigenicamente e co-circulantes em diversas regiões do país. Portanto, neste trabalho implementamos uma técnica de imunofluorescência indireta (IFI) que compara a reatividade da amostra testada (soro ou sangue) ao ZIKV e ao DENV. A plataforma de análise desta técnica consiste em células VERO infectadas ou não com ZIKV ou DENV. A detecção dos anticorpos IgG específicos para os vírus é feita pela incubação com anticorpo secundário anti-IgG humana conjugado a um fluoróforo, permitindo a visualização das células infectadas no microscópio de fluorescência. Para validar a técnica, foram testadas amostras com diagnóstico exclusivo para ZIKV ou dengue. A análise das mesmas demonstrou que, durante a fase aguda das duas infecções, os indivíduos não apresentaram reatividade para nenhum dos vírus testados. Já na fase convalescente, foi detectada reatividade positiva para cada caso. A partir deste resultado, foi possível determinar a soroconversão para ZIKV de três indivíduos envolvidos em casos de transmissão do vírus por transfusão de plaquetas em banco de sangue. Além disso, a IFI foi utilizada para diagnóstico sorológico de amostras de mães expostas ao ZIKV durante a gestação. A análise das mesmas demonstrou uma heterogeneidade com relação à reatividade ao DENV, o que inviabilizou a associação dos títulos destes anticorpos ao desfecho das malformações nos neonatos neste trabalho. A análise do sangue de cordão umbilical de um destes neonatos com quadro de microcefalia demonstrou a presença de IgG anti-ZIKV, evidenciando a imunidade passiva contra o ZIKV. Em conjunto, a análise de todas essas amostras mostrou que a IFI proposta foi eficiente como ferramenta auxiliar no diagnóstico destes pacientes. |
| Keywords: | Zika virus Dengue Sorologia Transfusão de plaquetas Gravidez Microcefalia Serology Platelet transfusion Pregnancy Microcephaly |
| Subject CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA |
| Production unit: | Instituto de Microbiologia Paulo de Góes |
| Publisher: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
| Issue Date: | Dec-2016 |
| Publisher country: | Brasil |
| Language: | por |
| Right access: | Acesso Aberto |
| Citation: | MONTEIRO, F. L. L. (2016). Implementação da técnica de imunofluorescência indireta para detecção de IgG anti-ZIKV e anti-DENV [Trabalho de conclusão de curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon. |
| Appears in Collections: | Ciências Biológicas - Microbiologia e Imunologia |
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