Avaliação in vitro da dopamina como potencial antiviral contra a infecção pelo vírus Chikungunya

Pozzi, Livia Graça

Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11422/23938

Type:	Trabalho de conclusão de graduação
Title:	Avaliação in vitro da dopamina como potencial antiviral contra a infecção pelo vírus Chikungunya
Author(s)/Inventor(s):	Pozzi, Livia Graça
Advisor:	Costa, Luciana Jesus da
Co-advisor:	Calil, Pedro Telles
Abstract:	O vírus Chikungunya (CHIKV) é um arbovírus que ocasiona uma doença febril aguda com alta morbidade, que pode evoluir para a cronicidade e afetar a qualidade de vida dos pacientes. A dopamina (DA) é um neurotransmissor monoaminérgico que atua através da interação com os seus receptores (DRs), divididos em duas famílias: tipo 1 (DR1 e DR5) e tipo 2 (DR2, DR3 e DR4). Os DRs apresentam diversas funções metabólicas, como a redução do estresse oxidativo. A infecção por CHIKV induz o estresse oxidativo, o que tem sido associado com a ativação da autofagia, sendo benéfico para a replicação viral. A hipótese do trabalho apresentado é que a DA limitaria a infecção por CHIKV devido à capacidade de reduzir o estresse oxidativo. O objetivo é avaliar o impacto do tratamento com a DA sobre a infecção por CHIKV. Em mamíferos, a DA atua principalmente no sistema nervoso central (SNC). Portanto, o modelo ideal para o estudo in vitro são células de origem neuronal, a exemplo da linhagem celular SH-SY5Y, que são células não diferenciadas de neuroblastoma de origem humana. Inicialmente, foi caracterizada a infecção por CHIKV nessa linhagem. As células foram infectadas com a cepa brasileira BHI3745 isolada na Feira de Santana na Bahia e a RJ-IB1 isolada na epidemia de CHIKV de 2016 no Rio de Janeiro. A infecção foi realizada em diferentes multiplicidades de infecção (MOIs), como 0.01, 0.05 e 0.1, e apresentaram produção de progênie viral, atingindo mais de 1x1010 PFU/mL. Além disso, ambos os isolados induziram inibição da síntese proteica global da célula hospedeira e morte celular, o que evidencia que a linhagem SH-SY5Y é altamente permissiva ao CHIKV. A expressão dos 5 DRs também foi confirmada nessas células através de RT-qPCR, tendo maior expressão de DR2 e DR4. Para avaliar o efeito da DA sobre a infecção, primeiro foi necessário saber se somente o composto pode afetar a viabilidade celular. Através do ensaio de MTT, até 200 µM de DA, observa-se que a viabilidade celular permanece superior a 80%. Em seguida, foi analisado o impacto da DA sobre a replicação viral na linhagem SH-SY5Y. Essas células foram infectadas com o CHIKV na MOI 0.01 e tratadas antes ou depois da infecção com diferentes concentrações de DA. A produção de partículas virais infecciosas foi quantificada por ensaio de Plaque. Em 24 h.p.i., tanto o pós-tratamento por 24 horas, quanto o pré-tratamento por 5 minutos, com 10 μM de DA, inibiu mais de 70% a replicação viral. A DA também apresentou efeito antiviral sobre a infecção por CHIKV na linhagem celular HEK293T, que são células renais humanas com alta permissividade ao CHIKV, além de serem um importante modelo para estudo sobre os DRs devido à presença do sistema dopaminérgico renal. Nessas células, o tratamento com 10 e 50 μM de DA inibiu a replicação viral em 24 h.p.i. em 86%, tendo indução da expressão dos DRs. Dessa forma, conclui-se que o aumento da expressão dos DRs possivelmente está associado com a redução da infecção na linhagem celular HEK293T. Ademais, a DA apresenta atividade antiviral em diferentes linhagens celulares humanas, mas ainda não se sabe quais vias estão relacionadas com esse efeito.
Keywords:	Vírus Chikungunya Dopamina Antivirais Receptores para dopamina Estresse oxidativo Chikungunya virus Dopamine Antiviral agents Dopamine receptors Oxidative stress
Subject CNPq:	CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA
Production unit:	Instituto de Microbiologia Paulo de Góes
Publisher:	Universidade Federal do Rio de Janeiro
Issue Date:	13-Dec-2023
Publisher country:	Brasil
Language:	por
Right access:	Acesso Aberto
Citation:	POZZI, Livia Graça. Avaliação in vitro da dopamina como potencial antiviral contra a infecção pelo vírus Chikungunya. 2023. 84 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Ciências Biológicas: Microbiologia e Imunologia) - Instituto de Microbiologia Paulo de Góes, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, 2023.
Appears in Collections:	Ciências Biológicas - Microbiologia e Imunologia

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