1. Pantheon
  2. Trabalhos Acadêmicos e Técnicos
  3. Trabalhos de Conclusão de Curso de Graduação
  4. Engenharia Química
Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11422/24108
Full metadata record
DC FieldValueLanguage
dc.contributor.advisorGutarra, Melissa Limoeiro Estrada-
dc.contributor.authorPereira, Juliana Christina Castanheira Vicente-
dc.date.accessioned2024-10-24T14:39:13Z-
dc.date.available2024-10-26T03:00:12Z-
dc.date.issued2015-08-
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11422/24108-
dc.languageporpt_BR
dc.publisherUniversidade Federal do Rio de Janeiropt_BR
dc.rightsAcesso Abertopt_BR
dc.subjectEnzimaspt_BR
dc.subjectTratamento terapêuticopt_BR
dc.subjectAtividade antileucêmicapt_BR
dc.subjectBactériaspt_BR
dc.subjectLeveduraspt_BR
dc.titleClonagem e expressão da enzima L-asparaginase de Zymomonas mobilis em Pichia pastorispt_BR
dc.typeTrabalho de conclusão de graduaçãopt_BR
dc.contributor.advisorLatteshttp://lattes.cnpq.br/2925411598516202pt_BR
dc.contributor.authorLatteshttp://lattes.cnpq.br/7153701917856048pt_BR
dc.contributor.advisorCo1Almeida, Rodrigo Volcan-
dc.contributor.advisorCo1Latteshttp://lattes.cnpq.br/6424652558098121pt_BR
dc.contributor.advisorCo2Einsfeldt, Karen-
dc.contributor.advisorCo2Latteshttp://lattes.cnpq.br/5410930924853520pt_BR
dc.contributor.referee1Itabaiana Junior, Ivaldo-
dc.contributor.referee1Latteshttp://lattes.cnpq.br/7696623737124766pt_BR
dc.contributor.referee2Godoy, Mateus Gomes de-
dc.contributor.referee2Latteshttp://lattes.cnpq.br/1077493805719854pt_BR
dc.contributor.referee3Lopes, Wagner-
dc.contributor.referee3Latteshttp://lattes.cnpq.br/0873385162744176pt_BR
dc.description.resumoA leucemia linfoblástica aguda (LLA) é um tipo de câncer que afeta a medula óssea, e cujo principal tratamento é o uso terapêutico da enzima L- asparaginase. Grande parte dos pacientes tratados apresenta resposta imune às enzimas disponíveis para essa finalidade, que são provenientes de Escherichia coli ou Erwinia chrysantemi. A L-asparaginase de Zymomonas mobilis, expressada tanto de forma nativa quanto por E. coli recombinante, foi estudada pelo Laboratório de Bioprocessos da COPPE-UFRJ, apresentando atividade antileucêmica.O presente trabalho visou promover a produção da L- asparaginase da bactéria Z. mobilis através da clonagem e expressão constitutiva na levedura Pichia pastoris. Para concluir as etapas de clonagem, o plasmídeo pGAPZαB contendo o gene L-asparaginase sob controle do promotor da enzima gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase foi inserido em E. coli JM109 para estoque, sendo posteriormente transformado em P. pastoris X33. Os organismos transformantes de levedura obtidos foram submetidos a seleção em placas de Petri contendo meio de cultivo sólido com Zeocina. Foram realizados então cultivos dos clones selecionados em frascos agitados contendo meio de expressão, em batelada simples e, posteriormente, realizando alimentação com glicerol, observando-se, ao longo dos cultivos, o comportamento do crescimento celular, o consumo de glicerol e atividade da enzima L-asparaginase no sobrenadante do meio de cultivo. Também foi avaliada a possibilidade da retenção da enzima no periplasma celular, por dosagem da atividade utilizando as células íntegras. Foram obtidos 17 clones, dos quais 2 apresentaram resistência a 1000 μg/mL de Zeocina. Os resultados indicaram, em batelada simples, atividades por grama de células iguais a 0,4 e 0,6 UI/g. Não foi detectada atividade enzimática no cultivo em batelada alimentada. A análise das células íntegras também não detectou a retenção da enzima no periplasma celular.pt_BR
dc.publisher.countryBrasilpt_BR
dc.publisher.departmentEscola de Químicapt_BR
dc.publisher.initialsUFRJpt_BR
dc.subject.cnpqCNPQ::ENGENHARIAS::ENGENHARIA QUIMICApt_BR
dc.embargo.termsabertopt_BR
Appears in Collections:Engenharia Química

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
JCCVPereira.pdf719.74 kBAdobe PDFView/Open
Show simple item record Recommend this item View Statistics


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.