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http://hdl.handle.net/11422/25196| Type: | Trabalho de conclusão de graduação |
| Title: | Avaliação da dinâmica microbiana em resposta à contaminação por hidrocarbonetos do petróleo e seu potencial no biomonitoramento de ambientes marinhos |
| Author(s)/Inventor(s): | Domingos, Ana Clara Abdala |
| Advisor: | Jurelevicius, Diogo de Azevedo |
| Co-advisor: | Santaren, Karen Caroline Ferreira |
| Abstract: | A contaminação por hidrocarbonetos do petróleo em ambientes marinhos é geralmente avaliada por métodos físico-químicos, como a cromatografia gasosa (CG). Entretanto, devido ao custo e a dificuldades logísticas, a implementação de CG como método de monitoramento contínuo e em larga escala é inviável. Microbiomas de ambientes marinhos contaminados por petróleo são enriquecidos de microrganismos capazes de degradar hidrocarbonetos, o que os tornam potenciais bioindicadores da contaminação. Sendo assim, este estudo visa desenvolver uma metodologia para monitorar a presença de hidrocarbonetos em ambientes marinhos através do uso de bioindicadores. Para atingir esse objetivo, primeiramente foi avaliado a eficiência da CG para quantificação de diferentes concentrações da fração solúvel em água do petróleo (FSA). O resultado obtido possuiu uma baixa sensibilidade e reprodutibilidade na detecção de FSA. Posteriormente, gêneros- alvos (GA) para uso no biomonitoramento da presença de hidrocarbonetos do petróleo foram estipulados com base em dados disponíveis de trabalhos previamente publicados. Um total de 5 GAs (GA-1, GA-2, GA-3, GA-4 e GA-5) foram selecionados: GA-1 e GA- 2 específicos para hidrocarbonetos alifáticos; GA-3 e GA-5 específicos para aromáticos; e GA-4 para alifáticos/aromáticos. Para confirmar a capacidade de degradação de hidrocarbonetos de cada GA estabelecido, bactérias da coleção de culturas do laboratório relacionadas aos GA foram reativadas e a capacidade de degradação de hexadecano, naftaleno e óleo cru por cada bactéria foi avaliada. Todos os 26 representantes dos GAs foram positivos para a degradação de pelo menos uma fonte de hidrocarboneto. Entretanto, bactérias dos GA-1 e GA-2 demonstraram principalmente capacidade de degradar hexadecano e óleo cru. Bactérias do GA-3 apresentaram capacidade de degradar naftaleno e/ou hexadecano e/ou óleo cru. A maioria das estirpes bacterianas do GA-4 degradou hexadecano, naftaleno e óleo cru, enquanto a bactéria do GA-5 degradou apenas naftaleno. Posteriormente, uma mistura contendo um representante de cada GA foi utilizada para simular a sucessão ecológica dos GAs em amostras marinhas contaminadas com hidrocarbonetos alifáticos (hexadecano), aromáticos (naftaleno) ou por uma mistura de hidrocarbonetos (óleo cru) durante 0, 5, 7, 9, 13 e 16 dias (T). Para analisar a sucessão ecológica, foi realizada a extração de DNA, seguida de sequenciamento do gene que codifica o rRNA 16S e de análises de bioinformática. O resultado mostrou: (i) a prevalência do GA-1 na presença de hexadecano; (ii) a prevalência do GA-4 a partir do dia 9 (T9) na presença de naftaleno, com um aumento da abundância relativa do GA-1 no dia 16; e (iii) a prevalência inicial do GA-1 na presença do óleo cru, com o aumento progressivo da abundância do GA-4 até o T16. Por fim, para cada GA, iniciadores específicos para amplificação do gene que codifica o rRNA 16S foram sintetizados. a especificidade dos iniciadores foi validada por PCR e, posteriormente, curvas-padrão para PCR quantitativo (qPCR) foram construídas. De todos os iniciadores avaliados, somente os iniciadores específicos para o GA-1 e GA-4 foram validados por PCR e apresentaram curvas-padrão para qPCR eficientes. Os resultados representam um importante passo no desenvolvimento de uma ferramenta de biomonitoramento da presença de hidrocarbonetos do petróleo em ambientes marinhos. |
| Keywords: | Monitoramento biológico Hidrocarbonetos derivados de petróleo PCR Sucessão microbiana Biological monitoring Microbial succession |
| Subject CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA |
| Production unit: | Instituto de Microbiologia Paulo de Góes |
| Publisher: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
| Issue Date: | 10-Dec-2024 |
| Publisher country: | Brasil |
| Language: | por |
| Right access: | Acesso Aberto |
| Citation: | DOMINGOS, A. C. A. (2024). Avaliação da dinâmica microbiana em resposta à contaminação por hidrocarbonetos do petróleo e seu potencial no biomonitoramento de ambientes marinhos [Trabalho de Conclusão de Curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon. |
| Appears in Collections: | Ciências Biológicas - Microbiologia e Imunologia |
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