Produção de esterases, lipases e bioemulsificantes pela plastisfera da Enseada de Bom Jesus, Ilha do Fundão, Baía de Guanabara, Rio de Janeiro

Abdon, Beatriz Balthazar

Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11422/25207

Type:	Trabalho de conclusão de graduação
Title:	Produção de esterases, lipases e bioemulsificantes pela plastisfera da Enseada de Bom Jesus, Ilha do Fundão, Baía de Guanabara, Rio de Janeiro
Author(s)/Inventor(s):	Abdon, Beatriz Balthazar
Advisor:	Laport, Marinella Silva
Co-advisor:	Cannelas, Anna Luiza Bauer
Abstract:	Plastisfera é a comunidade microbiana associada ao plástico, os quais são frequentemente encontrados em ambientes aquáticos poluídos, como a Enseada de Bom Jesus (EBJ). A despeito dos prejuízos da poluição por plásticos no ambiente, a qual exerce pressão seletiva sobre o microbioma local, pouco se sabe sobre o potencial biotecnológico da sua plastisfera. Este estudo visou analisar a produção de esterases, lipases, poliesterases e substâncias tensoativas produzidas por bactérias da plastisfera da EBJ. Foram coletadas 11 amostras plásticas nas águas da EBJ e em sua orla, incluindo polietileno de alta e baixa densidade, identificadas por espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier. Dessas amostras, foram isoladas 245 estirpes, identificadas por MALDI-TOF. O gênero mais frequente, de 18 distintos, foi Vibrio (18,4%), seguido por Aeromonas (13%). As estirpes foram inoculadas em meio Sierra com adição dos substratos Tween 20 para avaliação da produção de esterases. O ensaio foi interpretado pela presença de um halo de precipitação ao redor da colônia após 48h a 27oC e o Índice Enzimático (IE) foi calculado, sendo um IE ≥ 2,0, característico de uma estirpe com potencial enzimático. A partir das estirpes positivas para esterase (n = 75; 30,6%), foram conduzidos os demais experimentos. As estirpes esterase-positivas foram analisadas para a produção de lipase conforme descrito para esterase, apenas trocando o substrato para tween 80. Assim, 7,3% também foram positivas para lipase (13/75). A triagem de bioemulsificantes foi feita pelo índice de emulsificação em 24h (E24) em óleo mineral a partir do cultivo em meio Luria-Bertani (LB) e mínimo (MM), onde 4% (3/75) e 20% (15/75) das estirpes foram positivas, respectivamente. A produção de poliesterases foi verificada em meio LB e MM acrescidos de 1% de tributirina (TBT) ou policaprolactona (PCL). Dentre 69 estirpes testadas, 10 foram positivas no MM+TBT e dentre 61 testadas, 5 foram positivas em MM+PCL. O MM apresentou-se mais vantajoso para a triagem destas enzimas em relação ao LB. Os sobrenadantes dessas cinco estirpes que apresentaram atividade enzimática em MM+PCL foram avaliados quanto à termoestabilidade e a estabilidade a diferentes pHs. Nesta análise, Vibrio fluvialis PVC-7 se destacou pela manutenção da atividade enzimática nas temperaturas de 40 a 65 oC. Esses cinco sobrenadantes foram liofilizados, filtrados e concentrados, e apenas a estirpe Shewanella baltica PT-L-4 manteve sua atividade enzimática. Os cinco sobrenadantes também foram precipitados com sulfato de amônio (40% e 60%) e analisados por eletroforese sem condições desnaturantes e zimograma. Observaram-se bandas no gel de poliacrilamida, indicando a separação das proteínas presentes no extrato. Contudo, não foi observada atividade enzimática no zimograma. Com as culturas das cinco estirpes positivas em MM+PCL, fez-se um consórcio em microcosmos com diferentes tipos de plásticos, os quais foram monitorados por 56 dias a 27oC. Depois, os plásticos foram avaliados. Contudo, não houve alteração no peso nem na superfície dos plásticos, conforme evidenciado por microscopia eletrônica de varredura. Assim, esse estudo se estabelece como um dos poucos acerca da plastisfera da EBJ e evidencia-a como uma fonte de bioprospecção de novas soluções biotecnológicas para o plástico.
Keywords:	Biorremediação Enzimas Potencial biotecnológico Esterases Lipases Enzymes Biotechnological potential
Subject CNPq:	CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA
Production unit:	Instituto de Microbiologia Paulo de Góes
Publisher:	Universidade Federal do Rio de Janeiro
Issue Date:	13-Dec-2024
Publisher country:	Brasil
Language:	por
Right access:	Acesso Aberto
Citation:	ABDON, B. B. (2024). Produção de esterases, lipases e bioemulsificantes pela plastisfera da Enseada de Bom Jesus, Ilha do Fundão, Baía de Guanabara, Rio de Janeiro [Trabalho de Conclusão de Curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon.
Appears in Collections:	Ciências Biológicas - Microbiologia e Imunologia

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