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http://hdl.handle.net/11422/25211
Type: | Trabalho de conclusão de graduação |
Title: | Determinação de hospedeiros para bactérias epibiontes do gênero Saccharibacteria isoladas do biofilme dental ou subgengival |
Author(s)/Inventor(s): | Santiago, Lucas José Soares |
Advisor: | Colombo, Ana Paula Vieira |
Co-advisor: | Araújo, Lelia Lima |
Abstract: | O gênero Saccharibacteria compreende pequenas bactérias, encontradas em diversos ambientes, inclusive na microbiota oral humana. Nesse habitat, diferentes cepas estão associadas ao biofilme dental de sítios orais saudáveis, bem como de lesões inflamatórias presentes nas doenças periodontais (DP). Membros desse gênero necessitam estabelecer uma relação de epibiose com seus hospedeiros para se replicar, pois devido ao seu reduzido genoma, carecem de inúmeras vias biossintéticas essenciais para sua propagação. Apenas algumas cepas orais de Saccharibacteria foram co-cultivadas com hospedeiros, geralmente comensais da microbiota oral, tais como espécies dos gêneros Arachnia e Schaalia. Porém, pouco se sabe sobre o papel de Saccharibacteria no microambiente inflamatório associado às DP. Nossa hipótese propõe que, no biofilme disbiótico associado às DP, patógenos periodontais presentes em alta abundância podem exercer o papel de hospedeiros para cepas específicas de Saccharibacteria. Assim, nosso objetivo foi identificar as cepas de Saccharibacteria mais prevalentes no biofilme disbiótico de pacientes com DP, bem como avaliar in vitro a capacidade dos patógenos periodontais Fusobacterium nucleatum e Parvimonas micra de atuarem como hospedeiros das cepas identificadas. Amostras de biofilme subgengival obtidas de indivíduos com diferentes condições periodontais, atendidos na Clínica de Periodontia da Faculdade de Odontologia da Universidade Federal do Rio de Janeiro, foram cultivadas em anaerobiose. A presença de Saccharibacteria spp. foi avaliada através da amplificação por PCR da subunidade 16S do gene ribossomal (16S rRNA) para este gênero. 77 amostras de biofilme positivas foram filtradas (em filtro de 0,22μ) para o isolamento de Saccharibacteria spp. O DNA desses isolados foi obtido para amplificação do gene do 16S rRNA através da Nested PCR, e os amplicons sequenciados pelo método de Sanger. Dentre as 54 cepas clínicas isoladas e sequenciadas, observou-se uma alta prevalência dos filotipos HMT-346, HMT-869 e HMT-349, presentes em >80% das amostras de biofilme analisadas. Em menor frequência, encontramos as cepas HMT-952 (14%), HMT-957 (10%), HMT-955 (8%), HMT-488 (4%) e HMT-352 (4%). Em seguida, F. nucleatum e P. micra, bem como A. propionica e S. odontolytica foram testados em co-cultura como potenciais hospedeiros para as cepas clínicas de Saccharibacteria mais prevalentes. Nas condições de co-cultivo in vitro aplicadas, nenhuma das bactérias hospedeiras testadas suportou o crescimento das cepas clínicas. Entretanto, a capacidade dessas espécies de atuarem como hospedeiros não deve ser descartada. Novas condições metodológicas necessitam ser testadas para confirmar a capacidade das bactérias aqui propostas atuarem como hospedeiros eficientes para as cepas de Saccharibacteria identificadas. |
Keywords: | Periodontite Biofilmes Periodontitis Biofilms Saccharibacteria Fusobacterium nucleatum Parvimonas micra Epibionte |
Subject CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA |
Production unit: | Instituto de Microbiologia Paulo de Góes |
Publisher: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
Issue Date: | 4-Dec-2024 |
Publisher country: | Brasil |
Language: | por |
Right access: | Acesso Aberto |
Citation: | SANTIAGO, L. J. S. (2024). Determinação de hospedeiros para bactérias epibiontes do gênero Saccharibacteria isoladas do biofilme dental ou subgengival [Trabalho de Conclusão de Curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon. |
Appears in Collections: | Ciências Biológicas - Microbiologia e Imunologia |
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