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http://hdl.handle.net/11422/25374| Type: | Trabalho de conclusão de graduação |
| Title: | Proteínas amiloides no biofilme de bactérias anaeróbias estritas |
| Author(s)/Inventor(s): | Cruz, Vitor Chuva Costa de Almeida |
| Advisor: | Lobo, Leandro Araújo |
| Co-advisor: | Costa, Scarlathe Bezerra da |
| Abstract: | O microbioma intestinal é o mais abundante do corpo humano e desempenha, coletivamente, diversas funções no hospedeiro. Estudos sobre a relação microbiota - hospedeiro revelam que a liberação de produtos bacterianos como moléculas análogas a neurotransmissores, LPS e proteínas com características amiloides podem influenciar na homeostase do Sistema Nervoso Central (SNC) por indução de uma resposta imunológica, atravessando a barreira hematoencefálica, ou por sinalização direta através do nervo vago. Baseado nisso, surgiu o termo “eixo cérebro-intestino-microbiota”, no qual a disbiose no microbioma do hospedeiro começou a ser observada em indivíduos com doenças neurodegenerativas (DNS). A agregação de amiloides humanos no SNC leva à perda da homeostase fisiológica do sistema, que se associa a danos cognitivos e a DNS como a Doença de Alzheimer. Desde o descobrimento da fímbria curli em 2002, a descrição e caracterização de amiloides bacterianos vem aumentando gradativamente, identificando diversos amiloides e suas funções para as células como a proteínas Curli presente em Enterobactérias, Proteína Fap C e B de Pseudomonas sp., Proteínas TasA de Bacillus sp., Aap e Bap presente em Staphylococcus sp. entre outras. Embora em crescimento, a literatura existente sobre amiloides bacterianos presentes na formação do biofilme bacteriano se limita a certos grupos de bactérias sendo majoritariamente relacionado a microrganismos aeróbios. Por isso, o objetivo deste estudo é utilizar abordagens in silico, fenotípicas e moleculares para determinar se bactérias anaeróbias estritas da microbiota intestinal são capazes de produzir proteínas de caráter amiloide e se tais proteínas são utilizadas na formação de seus biofilmes. Para analisar a produção de amiloides durante o crescimento de bactérias anaeróbias, foram realizados os ensaios de crescimento em ágar Brucella contendo vermelho do congo e ensaio de depleção de vermelho congo as células bacterianas, onde todas as cepas estudadas apresentaram ligação ao corante, tanto durante o seu crescimento, quando pós crescimento. Para detectar a presença das proteínas amiloides no biofilme dessas bactérias, foram realizados ensaios de formação do biofilme bacteriano com posterior coloração por corantes específicos para amiloides, vermelho congo e Tioflavina T, sendo mensurado em espectrofotômetro, além da análise em microscopia de fluorescência do biofilme, onde foi possível observar a emissão de fluorescência específica indicando a ligação dos corantes com proteínas amiloides. Foi realizado um extrato do biofilme das amostras que apresentarem maior produção dos amiloides, que será marcado por anticorpos anti-fibra e anti- oligômeros, através da técnica de Dot Blot, onde todas as cepas testadas apresentaram ligação de ambos os anticorpos em seus biofilmes. Foram realizadas análise in sílico do proteoma da cepa de F. nucleatum onde 23 possíveis amiloides foram identificados. Esses resultados abrem caminho para entender melhor como a microbiota intestinal pode influenciar o hospedeiro, especialmente em doenças como o Alzheimer, ajudando no desenvolvimento de novas estratégias para tratar essas condições no futuro. Além de auxiliar para melhor compreensão sobre bactérias anaeróbias e sua relação com a saúde. |
| Keywords: | Microbioma gastrointestinal Bactérias anaeróbias Amiloides bacterianos Eixo Encéfalo-Intestino Biofilmes Gastrointestinal microbiome Brain-Gut axis Biofilms |
| Subject CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA |
| Production unit: | Instituto de Microbiologia Paulo de Góes |
| Publisher: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
| Issue Date: | 13-Dec-2024 |
| Publisher country: | Brasil |
| Language: | por |
| Right access: | Acesso Aberto |
| Citation: | CRUZ, V. C. C. de A. (2024). Proteínas amiloides no biofilme de bactérias anaeróbias estritas [Trabalho de Conclusão de Curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon. |
| Appears in Collections: | Ciências Biológicas - Microbiologia e Imunologia |
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