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http://hdl.handle.net/11422/28327
| Type: | Trabalho de conclusão de graduação |
| Title: | Caracterização estrutural, funcional e expressão heteróloga da proteína LipL32 objetivando o desenvolvimento de teste diagnóstico para leptospirose |
| Author(s)/Inventor(s): | Almeida, Thais Dias Costa |
| Advisor: | Cruz, Marco Antônio Lopes |
| Co-advisor: | Santos, Izabela Silva dos |
| Abstract: | A leptospirose é uma zoonose de ampla distribuição mundial, causada por bactérias do gênero Leptospira, sendo um problema de saúde pública negligenciado. Esta doença é transmitida ao homem através do contato com a urina de animais infectados, principalmente os roedores. Os métodos de diagnóstico da leptospirose, atualmente aplicados no Brasil, possuem alto custo e demoram mais de 15 dias para a confirmação dos casos, o que atrasa o início do tratamento, muitas vezes levando a óbito. Recentemente, proteínas de membrana externa foram identificadas como possíveis alvos para produção de vacinas e diagnóstico, como a proteína LipL32, porém a patogênese da doença ainda é pouco esclarecida, especialmente quanto aos processos de invasão, adesão e colonização na célula hospedeira. Com isso, o trabalho tem como objetivo caracterizar e expressar a proteína LipL32 de Leptospira interrogans objetivando o desenvolvimento de testes para o diagnóstico da leptospirose. Posto isto, o trabalho foi desenvolvido visando a caracterização estrutural, funcional e a expressão heteróloga da proteína LipL32 de Leptospira interrogans. O gene Lepto01 foi isolado e clonado em vetor de expressão pFastBac, transformado em células de E.coli linhagem DHBac10 (Invitrogen), contendo o genoma do baculovírus (bacmid). Esse DNA foi transfectado em células da linhagem SF9 (Spodoptera frugiperda), resultando na expressão prévia da proteína LipL32. Os resultados foram positivos para clonagem e expressão utilizando o sistema baculovírus/células de inseto. A análise in sílico mostra que a LipL32 dispõe de regiões conservadas com outras espécies da bactéria, regiões de desordem que podem conferir flexibilidade e adaptabilidade para interação entre proteínas, além da região carregada negativamente que pode indicar um papel na interação com a superfície da célula hospedeira, região SdN. O trabalho permitiu a compreensão da estrutura e função da LipL32 e inferir sobre os possíveis mecanismos de adesão entre o patógeno e a célula hospedeira. Além disso, pode contribuir para a inovação no campo da leptospirose para o desenvolvimento de diagnóstico. |
| Keywords: | Leptospira spp. Leptospirose LipL32 Expressão Heteróloga Diagnóstico Saúde Pública |
| Subject CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::SAUDE COLETIVA::SAUDE PUBLICA |
| Production unit: | Instituto de Biodiversidade e Sustentabilidade |
| Publisher: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
| Issue Date: | 2024 |
| Publisher country: | Brasil |
| Language: | por |
| Right access: | Acesso Aberto |
| Citation: | ALMEIDA, Thais Dias Costa. Caracterização estrutural, funcional e expressão heteróloga da proteína LipL32 objetivando o desenvolvimento de teste diagnóstico para leptospirose. 2024. 48 f. TCC (Graduação) - Curso de Ciências Biológicas, Instituto de Biodiversidade e Sustentabilidade, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Macaé, 2024. |
| Appears in Collections: | Ciências Biológicas |
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