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http://hdl.handle.net/11422/28463
| Type: | Trabalho de conclusão de graduação |
| Title: | Estudo e validação de um método colorimétrico para detecção de betalactamases em Neisseria gonorrhoeae |
| Author(s)/Inventor(s): | Pacheco, Luiz Eduardo Teixeira de Araújo |
| Advisor: | Bonelli, Raquel Regina |
| Abstract: | Neisseria gonorrhoeae é uma bactéria gram-negativa causadora da gonorreia, uma infecção sexualmente transmissível. A penicilina G foi uma das primeiras drogas utilizadas no tratamento da doença. Diversos mecanismos podem reduzir a suscetibilidade de gonococos a penicilina, mas entre eles destacam-se as betalactamases, que elevam a sua concentração mínima inibitória para valores muito acima do ponto de corte de resistência. Em gonococos, a ocorrência de betalactamases está associada à aquisição de um plasmídeo contendo o gene blaTEM, nas suas variantes blaTEM-1 e blaTEM- 135, ambos codificadores de betalactamases de espectro estrito. Contudo, o gene blaTEM-135 apresenta uma mutação que o aproxima da blaTEM-20, uma enzima capaz de hidrolisar ceftriaxona, droga atualmente preconizada para o tratamento da doença. Atualmente, o método utilizado para detecção de cepas produtoras de betalactamases em gonococos é o teste do nitrocefin, uma cefalosporina que muda de cor ao ser hidrolisada. No entanto, esse teste apresenta a necessidade de insumos dedicados nem sempre facilmente acessíveis. Dessa forma, este estudo pretende avaliar um novo método colorimétrico, de baixo custo, que usa como insumo a própria penicilina, além de vermelho de fenol como indicador de pH, para detecção de betalactamases em gonococos. Para tanto foram usadas como referências 10 amostras não portadoras do gene, 18 portadoras de blaTEM-1 e 7 portadoras de blaTEM-135 e realizadas as seguintes análises: (i) determinação da sensibilidade e especificidade do método colorimétrico proposto; (ii) avaliação do impacto do tipo de penicilina (sódica ou potássica) no desempenho do teste; (iii) verificação do impacto da variante de blaTEM (TEM-1 ou TEM-135) sobre o tempo de viragem da solução e (iv) investigação sobre o uso da metodologia para a diferenciação presuntiva entre cepas produtoras de TEM-1 e TEM-135. Como resultados, em testes realizados com 1 ml de tampão o método apresentou 100% de especificidade, mas não 100% de sensibilidade, já que duas amostras portadoras de blaTEM foram negativas na metodologia. Já os resultados obtidos com 100 μl de solução revelaram 100% de especificidade e 100% de sensibilidade. Quanto à comparação entre os tipos de penicilina utilizados no teste, observou-se que o uso de penicilina sódica em 1 mL de solução resultou, em geral, em tempos um pouco mais curtos de viragem de cor em relação à penicilina potássica. Entretanto, essa diferença não foi encontrada em 100 μL. Além disso, foi possível identificar que portadoras de blaTEM-135 provocam tempo de viragem mais rápido do que as amostras que carreiam blaTEM-1. Por fim, os testes com cefalotina em 500 μL de solução demonstraram uma clara distinção entre as duas variantes estudadas, uma vez que as portadoras de blaTEM-135 tiveram viragem da solução indicadora para coloração amarelo claro até os 20 minutos após a inoculação. Em síntese, nossos resultados mostram que o teste colorimétrico com penicilina em 100 μL detecta gonocococos produtores de betalactamases e pode ser usado com cefalotina para triar, de forma presuntiva, estirpes produtoras de blaTEM-135. |
| Keywords: | Neisseria gonorrhoeae Resistência às penicilinas Penicillin resistance |
| Subject CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA |
| Production unit: | Instituto de Microbiologia Paulo de Góes |
| Publisher: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
| Issue Date: | 25-Nov-2025 |
| Publisher country: | Brasil |
| Language: | por |
| Right access: | Acesso Aberto |
| Citation: | Pacheco, L. E. T. A. (2025). Estudo e validação de um método colorimétrico para detecção de betalactamases em Neisseria gonorrhoeae [Trabalho de Conclusão de Curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon. |
| Appears in Collections: | Ciências Biológicas - Microbiologia e Imunologia |
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