Pantheon Institutional repository
Collect, preserve and disseminate digital academic production in all areas of knowledge.
Comprise the assets of the repository, in addition to theses and dissertations at UFRJ, scientific articles, electronic books, book chapters and papers presented at events for teachers, researchers, administrative staff and students of master's and doctoral degrees.
Please use this identifier to cite or link to this item:
http://hdl.handle.net/11422/28658
| Type: | Trabalho de conclusão de graduação |
| Title: | Avaliação da ligação de anticorpos anti-tolC em bactérias superexpressando bombas de efluxo devido a pressão induzida por antimicrobianos |
| Author(s)/Inventor(s): | Santos, Yasmin Barros dos |
| Advisor: | Olsen, Priscilla Christina |
| Co-advisor: | Teixeira, Bárbara de Almeida |
| Abstract: | A resistência aos antimicrobianos configura-se como um alarmante problema de saúde pública. Dentre as diversas estratégias de resistência de bactérias Gram-negativas, é válido destacar as bombas de efluxo, responsáveis pela extrusão de diversos componentes. Tal mecanismo está associado à diminuição da concentração intracelular do medicamento, reduzindo seu efeito. A TolC é uma proteína transmembranar presente na membrana externa que pode compor diferentes bombas de efluxo. A superexpressão de proteínas que compõem essas bombas está associada a casos de resistência aos antimicrobianos, o que as destacam como potenciais alvos contra patógenos resistentes. Este trabalho objetiva induzir um estado de resistência através da adaptação das bactérias a crescentes concentrações de antimicrobiano para avaliar a ligação de anticorpos anti-TolC em bactérias superexpressando bombas de efluxo. Em todos os experimentos foram utilizadas cepas de Escherichia coli ATCC 25922 e Klebsiella quasipneumoniae ATCC 700603. Para induzir alterações no padrão da expressão da bomba de efluxo, as bactérias utilizadas nos ensaios foram submetidas a concentrações crescentes de cloranfenicol. O ensaio de indução de resistência foi conduzido com base na MIC previamente determinada pelo grupo para o cloranfenicol, estabelecida em 1,9 μg/ml para ambas as cepas. Para isso, placas de meio MacConkey foram preparadas com diferentes concentrações de antibiótico: Meio sem antibiótico, 1⁄2 x Adapt, 1x Adapt, 2x Adapt, 4x Adapt, 8x Adapt, e 16x Adapt. Inicialmente, a bactéria foi semeada no meio sem antibiótico. Após o crescimento bacteriano nessa placa, as colônias foram repicadas para a placa 1⁄2 x Adapt. Esse processo foi realizado de forma sequencial, com a concentração de antimicrobiano dobrando a cada passagem. Durante esse processo, a extração de proteínas foi realizada para avaliação por Western Blotting. O soro imune de camundongos contendo anticorpos anti-TolC foi utilizado para a análise por WB da ligação dos anticorpos IgG murinos anti-TolC nas amostras bactérias adaptadas. A avaliação da MIC para cloranfenicol e tetraciclina demonstrou que ambas as cepas se tornaram mais resistentes aos antimicrobianos. Nossos ensaios preliminares demonstram uma expressão aumentada de TolC nas bactérias coletadas de placas contendo 4x Adapt de cloranfenicol, mas, outras análises ainda devem ser feitas. Esse resultado sugere que os anticorpos anti-TolC se ligam mais nas bactérias resistentes. Os ensaios funcionais demonstraram que a presença de anticorpos anti-TolC não induziu a morte ou mudou o perfil de resistência ao cloranfenicol e tetraciclina em K. quasipneumoniae 4x adaptada ao cloranfenicol, mesmo apresentando aumento da expressão de TolC, porém parece exercer algum efeito, ainda que comedido, na MIC de E. coli, que foi reduzida. Ensaios para avaliar o impacto da interação anticorpo/bactéria na sobrevida bacteriana indicam que o grupo incubado com IgG específica para a porção extracelular de E. coli pareceu reduzir a sobrevida bacteriana. Os anticorpos anti-TolC de E. coli também foram capazes de afetar a motilidade bacteriana. Essas análises são fundamentais para um melhor entendimento sobre os mecanismos de resistência e para fornecer evidências mais robustas que possam contribuir para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas alternativas. |
| Keywords: | Anticorpos Resistência microbiana a medicamentos Antibodies |
| Subject CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA |
| Production unit: | Instituto de Microbiologia Paulo de Góes |
| Publisher: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
| Issue Date: | 19-Nov-2025 |
| Publisher country: | Brasil |
| Language: | por |
| Right access: | Acesso Aberto |
| Citation: | Santos, Y. B. (2025). Avaliação da ligação de anticorpos anti-tolC em bactérias superexpressando bombas de efluxo devido a pressão induzida por antimicrobianos [Trabalho de Conclusão de Curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon. |
| Appears in Collections: | Ciências Biológicas - Microbiologia e Imunologia |
Files in This Item:
| File | Description | Size | Format | |
|---|---|---|---|---|
| YBSantos.pdf | 1.44 MB | Adobe PDF | View/Open |
Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.