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http://hdl.handle.net/11422/28660
| Type: | Trabalho de conclusão de graduação |
| Title: | Estudo dos efeitos do bacilo diftérico e das vesículas extracelulares purificadas nas larvas do inseto Galleria mellonella |
| Author(s)/Inventor(s): | Muniz, Luana Mel Coutinho |
| Advisor: | Moreira, Lilian de Oliveira |
| Co-advisor: | Barbosa, Luiza de Souza |
| Abstract: | A difteria é uma doença causada pela bactéria toxinogênica Corynebacterium diphtheriae (Cdi), que afeta principalmente o trato respiratório superior dos seres humanos (nariz, laringe, faringe, tonsilas) e também pode causar lesões cutâneas e nas mucosas. O gênero faz parte do grupo CMNR (Corynebacterium, Mycobacterium, Nocardia e Rhodococcus), que são caracterizados pela alta quantidade de ácidos micólicos em sua parede celular). A difteria clássica é caracterizada pela formação de placas acinzentadas nas amígdalas e na garganta, chamadas de pseudomembranas, e o inchaço dos gânglios linfáticos cervicais. Os sinais clínicos citados são consequência da ação da toxina diftérica (DT), o principal fator de virulência desta espécie bacteriana. Apesar do sucesso da vacinação contra difteria, observou-se um aumento dos casos de difteria no mundo, incluindo relatos de infecções sistêmicas associadas a cepas não toxinogênicas de Cdi. Tal evento pode estar relacionado com outros fatores de virulência produzidos pela bactéria independentemente da DT. Paralelamente, as Vesículas Extracelulares (VEs) são estruturas produzidas e secretadas pela célula bacteriana, formadas por bicamada lipídica, que carreiam moléculas variadas, incluindo fatores de virulência. Até o momento, não há evidências publicadas da produção de VEs por Cdi. Portanto, este estudo tem como objetivo investigar o papel do bacilo diftérico e das VEs de Cdi no processo de infecção e na resposta imunitária do hospedeiro. Para isso, larvas do inseto Galleria mellonella foram selecionadas como modelo experimental com base em estudos prévios que demonstram a interação entre os insetos e o bacilo diftérico. As VEs provenientes da cepa de Cdi ATCC 27012 foram purificadas por meio de ultrafiltração de fluxo tangencial seguida de ultracentrifugação. As larvas foram infectadas com uma suspensão das cepas C. diphtheriae ATCC 27010, ATCC 27012, CDC E8392, HC02, NCTC13129, Nocardia spp. e Rhodococcus equi (DO600 0,8 = 7x108 UFC/mL; DO600 1.0 = 1,2x109 UFC/mL; DO600 2.0 = 3x109 UFC/mL) ou 10μg/mL de VEs, seguido de incubação das larvas à 25oC ou 37oC. As larvas foram observadas por 5 dias após a infecção e características como melanização, atividade, formação de casulo, sobrevivência, atividade de fenoloxidase na hemolinfa e contagem de hemócitos na hemolinfa foram avaliadas. Os resultados preliminares mostraram que as larvas sobreviveram à infecção pela bactéria à 25oC nas três concentrações testadas, e não ocorreu efeito da injeção das VEs nessa temperatura, mantendo um índice de saúde elevado. Ademais, as larvas também sobreviveram à 1,2x109 UFC/mL e às VEs na temperatura de 37oC. Entretanto, quando as larvas foram incubadas à 37oC a 3x109 UFC/mL a taxa de sobrevivência caiu para menos de 20% e o índice de saúde também decaiu. Os resultados da melanização na hemolinfa demonstram baixa atividade de fenoloxidase na hemolinfa 6 horas pós infecção, a contagem de hemócitos também decaiu em relação ao controle. |
| Keywords: | Corynebacterium diphtheriae Vesículas extracelulares Difteria Extracellular vesicles Diphtheria |
| Subject CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA |
| Production unit: | Instituto de Microbiologia Paulo de Góes |
| Publisher: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
| Issue Date: | 24-Nov-2025 |
| Publisher country: | Brasil |
| Language: | por |
| Right access: | Acesso Aberto |
| Citation: | Muniz, L. M. C. (2025). Estudo dos efeitos do bacilo diftérico e das vesículas extracelulares purificadas nas larvas do inseto Galleria mellonella [Trabalho de Conclusão de Curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon. |
| Appears in Collections: | Ciências Biológicas - Microbiologia e Imunologia |
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