Desenvolvimento de método de análise de Pterinas por cromatografia líquida acoplada a espectrometro de massas de alta resolução para diagnóstico de Fenilcetonúria atípica

Castro, Juliana de Lima

Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11422/5612

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DC Field	Value	Language
dc.contributor.advisor	Scalco, Fernanda Bertão	-
dc.contributor.author	Castro, Juliana de Lima	-
dc.date.accessioned	2018-11-04T19:55:53Z	-
dc.date.available	2023-12-21T03:03:36Z	-
dc.date.issued	2016	-
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/11422/5612	-
dc.language	por	pt_BR
dc.publisher	Universidade Federal do Rio de Janeiro	pt_BR
dc.rights	Acesso Aberto	pt_BR
dc.subject	Pterina	pt_BR
dc.subject	Cromatografia líquida	pt_BR
dc.subject	Espectroscopia de massa	pt_BR
dc.subject	Fenilcetonúria atípica	pt_BR
dc.title	Desenvolvimento de método de análise de Pterinas por cromatografia líquida acoplada a espectrometro de massas de alta resolução para diagnóstico de Fenilcetonúria atípica	pt_BR
dc.type	Trabalho de conclusão de graduação	pt_BR
dc.contributor.advisorLattes	http://lattes.cnpq.br/1990593659373379	pt_BR
dc.contributor.authorLattes	http://lattes.cnpq.br/0489626452815653	pt_BR
dc.description.resumo	Pterinas são substâncias de ocorrência natural, estruturalmente relacionadas ao grupo das pteridinas. Elas podem existir nas formas conjugada e não conjugada. Dentre as pterinas não conjugadas mais importantes está a tetraidrobiopterina (BH4), que é um cofator essencial na função catalítica de várias enzimas como a fenilalanina hidroxilase (PAH). Uma das aplicações da detecção de pterinas em fluidos biológicos é o diagnóstico de fenilcetonúria (PKU) atípica, um erro inato de metabolismo por deficiência de BH4, que causa progressivamente retardo mental grave, convulsões, retardo psicomotor, comportamento agressivo, entre outros sintomas. Quatro tipos de PKUs atípicas são conhecidas por defeitos na biossíntese ou regeneração do BH4: deficiências de guanosina trifosfato cicloidrolase I (GTPCH I), de piruvoil-tetraidropterina sintase (PTPS), deficiência de diidropteridina redutase (DHPR) e da pterina 4-α-carbinolamina desidratase (PCD). No metabolismo de BH4 podem ser formados 7-biopterina, 7-neopterina, 6-biopterina, 6-neopterina, além de pterina e isoxantopterina. Neste trabalho foi desenvolvido um método analítico baseado na técnica de cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas de alta resolução focado na caracterização dos metabólitos de BH4 para diagnóstico de PKU atípica. Após os ensaios de otimização da cromatografia e do modo de varredura de íons de espectrômetro de massas conclui-se que uma coluna de cromatografia líquida de ultra eficiência (CLUE), com partículas de diâmetro de 1,9 μm, foi a mais adequada para separar os isômeros 6-biopteria e 7-biopterina, e o modo de varredura de íons selecionados foi necessário para aumentar a sensibilidade do método e promover a detecção de isoxantopterina, que está em baixa concentração na urina. Com isso, a varredura de íons totais, importante para investigação de possíveis novos metabólitos de BH4, foi realizada simultaneamente à varredura de íons selecionados. O método proposto foi validado para os analitos 6- biopterina, pterina, isoxantopterina, 7-biopterina e 7-neopterina e mostrou boa linearidade, seletividade e repetitividade, entre outros parâmetros avaliados. Os resultados mostraram que para manter as concentrações dos metabólitos de BH4 estáveis por longos períodos as amostras precisam ser submetidas a prévia oxidação antes de serem estocadas. Além da validação e estabilidade, foi estimado o intervalo de referência das pterinas para uma população saudável de 0 a 17 anos. O método desenvolvido se mostrou eficiente para a detecção dos marcadores do metabolismo de BH4 e, consequentemente, para aplicação no diagnóstico de fenilcetonúria atípica.	pt_BR
dc.publisher.country	Brasil	pt_BR
dc.publisher.department	Instituto de Química	pt_BR
dc.publisher.initials	UFRJ	pt_BR
dc.subject.cnpq	CNPQ::CIENCIAS EXATAS E DA TERRA::QUIMICA	pt_BR
dc.embargo.terms	aberto	pt_BR
Appears in Collections:	Química

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