Use este identificador para citar ou linkar para este item: http://hdl.handle.net/11422/1670
Tipo: Patente
Título: Método para clonagem, expressão e purificação do polipeptídeo amilóide das ilhotas pancreáticas humanas
Depositante/Titular: Universidade Federal do Rio de Janeiro
Autor(es)/Inventor(es): Lopes, Dahabada Helena José
Ferreira, Sérgio Teixeira
Sogayar, Mari Cleide
Degaki, Theri Leica
Colin, Christian
Resumo: Método para clonagem e expressão do polipeptídeo das ilhotas pancreáticas (IAPP) maduro humano sob a forma recombinante, utilizando um sistema de expressão heteróloga em Escherichia coli baseado no promotor Lacl-T7 RNA polimerase, no qual um fragmento de DNA que contém a seqüência que codifica o peptídeo maduro de IAPP é amplificado por transcrição reversa e reação em cadeia da DNA polimerase (RT-PCR) a partir de RNA total derivado de ilhotas pancreáticas humanas, clonado em vetor de expressão como descrito acima e expresso em bactérias, e método de purificação empregando-se as etapas de lise das células, centrifugação do meio e resuspensão do precipitado em presença de agente desnaturante, centrifugação da solução, remoção do material insolúvel, coleta e filtração do sobrenadante clarificado, ligação da proteína a coluna de afinidade contendo íons metálicos imobilizados, clivagem com protease e eluição da rh-lAPP em forma purificada.
Palavras-chave: Polipeptídeo Amilóide das Ilhotas Pancreáticas
clonagem
Assunto CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS
Departamento: Instituto de Bioquímica Médica
Data de depósito: 23-Mar-2004
Data de publicação: 1-Nov-2005
País de publicação: Brasil
Idioma da publicação: por
Tipo de acesso: Acesso Aberto
N. Patente: PI 0400735-2 A2
URI: http://hdl.handle.net/11422/1670
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