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http://hdl.handle.net/11422/20162
Type: | Trabalho de conclusão de graduação |
Title: | Aderência de bactérias do gênero Prevotella a componentes da matriz extracelular humana |
Author(s)/Inventor(s): | Marre, Andressa Temperine de Oliveira |
Advisor: | Lobo, Leandro Araújo |
Co-advisor: | Ferreira, Renata Boente |
Abstract: | Prevotella é uma bacteria Gram-negativa, anaeróbia, que está associada com infecções oportunistas na cavidade oral, vaginal e trato gastrointestinal. A adesão a tecidos do hospedeiro é considerada um passo fundamental para o início de um processo infeccioso e persistência. P. intermedia, P. melaninogenica e P. nigrescens requerem uma capacidade de adesão para iniciar a colonização na região sulco gingival e induzir um quadro de periodontite. Esse estudo teve como objetivo avaliar a interação entre Prevotella spp. e componentes da MEC, e também identificar os ligantes bacterianos responsáveis por essa adesão. Inicialmente, laminina foi imobilizada em lamínulas de vidro e desafiadas com diferentes concentrações de bactérias. Os resultados preliminares demonstraram a adesão de forma dose dependente de P. nigrescens e P. melaninogenica. O resultado mostra uma média de bactérias aderidas em 10 campos de 0,049 mm² escolhidos aleatoriamente e contados com o programa Image J. Para P. melaninogenica, de 599,5 Bac/CV na concentração de 5.107 CFU/mL, 141 Bac/CV na concentração de 107 CFU/mL e a adesão no controle negativo (BSA) foi de 38 Bac/CV na concentração de 108 CFU/mL. Em P. nigrescens, a média obtida foi de 316,6 Bac/CV na concentração de 5.107 CFU/mL, 155,4 Bac/CV na concentração de 107 CFU/mL, e a adesão ao controle negativo (BSA) foi de 98,1 Bac/CV na concentração de 108 CFU/mL. Testes com P. intermedia não demonstraram adesão a laminina. Para identificação dos ligantes, foi realizada uma extração de proteínas de membrana externa (PMEs) que foi visualizada por eletroforese e técnicas de coloração sensíveis. Essas proteinas foram submetidas a uma coluna de afinidade por cromatografia que consiste em laminina immobilizada em Sefarose NHS-ativada. As proteinas eluídas da coluna foram submetidas a análise por SDS-PAGE e coloração com nitrato de prata e azul de coomassie coloidal. As bandas e as amostras eluídas passaram por um processo de digestão com tripsina e enviadas para análise de espectometria de massas. Os resultados indicam que as espéceis de P. nigrescens e P. melaninogenica são capazes de se aderir a laminina, e P. nigrescens possui uma proteína com função de adesina. O estudo nos permitirá entender os mecanismos envolvidos no processo de adesão bacteriana a tecidos do hospedeiro e ajudar a estabelecer novas estratégias para prevenir essa colonização. |
Keywords: | Laminina Prevotella Matriz extracelular Laminin Extracellular matrix Aderência bacteriana Bacterial adhesion |
Subject CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA |
Production unit: | Instituto de Microbiologia Paulo de Góes |
Publisher: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
Issue Date: | Dec-2017 |
Publisher country: | Brasil |
Language: | por |
Right access: | Acesso Aberto |
Citation: | MARRE, A. T. de O. (2017). Aderência de bactérias do gênero Prevotella a componentes da matriz extracelular humana [Trabalho de conclusão de curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon. |
Appears in Collections: | Ciências Biológicas - Microbiologia e Imunologia |
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