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http://hdl.handle.net/11422/20437| Type: | Trabalho de conclusão de graduação |
| Title: | Caracterização de lipases de mamona (Ricinus communis) expressas em Pichia pastoris |
| Author(s)/Inventor(s): | Massaglia, Luca Campos, Gabriel Mendes |
| Advisor: | Almeida, Rodrigo Volcan |
| Co-advisor: | Brêda, Gabriela Coelho |
| Co-advisor: | Itabaiana Junior, Ivaldo |
| Abstract: | Previamente, o nosso grupo de pesquisa clonou em Pichia pastoris duas lipases presentes na membrana de corpúsculos lipídicos da semente de Ricinus communis, denominadas RcOBL1 e RcATGL, gerando uma biblioteca de 20 recombinantes com 10 para cada lipase. Nesse contexto, o presente trabalho se inseriu na produção e caracterização dos extratos brutos dos sobrenadantes dos cultivos dos recombinantes contendo as lipases de interesse. A partir da biblioteca gerada, duas cepas foram selecionadas, uma para cada lipase, em que os meios de cultura, devido a expressão extracelular, apresentaram maior atividade hidrolítica no éster 4-metilumbeliferil heptanoato (MUF-7), alcançando valores de atividade de 148,0 U/L e 132,8 U/L para RcOBL1 e RcATGL, respectivamente, em cultivo em frascos agitados. Dois métodos de concentração do meio de cultura, liofilização e salting out, foram viáveis para as amostras contendo as lipases estudadas, acarretando um aumento de atividade entre 111 e 198,5%. Através da caracterização, foi determinado que ambas as lipases apresentaram melhor atividade em temperaturas acima de 50 °C e pH em torno de 5, além de uma preferência por substratos de cadeia média e uma boa estabilidade ao congelamento. O extrato bruto concentrado, no entanto, não foi capaz de hidrolisar tributirina e óleos vegetais, o que pode ser explicado pela baixa produção das lipases de interesse, conforme observado em eletroforese em gel de poliacrilamida. |
| Keywords: | Lipase Semente de mamona Pichia pastoris |
| Subject CNPq: | CNPQ::ENGENHARIAS::ENGENHARIA QUIMICA::TECNOLOGIA QUIMICA |
| Production unit: | Escola de Química |
| Publisher: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
| Issue Date: | 16-Feb-2023 |
| Publisher country: | Brasil |
| Language: | por |
| Right access: | Acesso Aberto |
| Appears in Collections: | Engenharia de Bioprocessos |
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