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http://hdl.handle.net/11422/21895| Type: | Trabalho de conclusão de graduação |
| Title: | Identificação de uma atividade 3’- nucleotidásica presente na superfície da ameba de vida livre Acanthamoeba Castellanii e seu possível papel biológico |
| Author(s)/Inventor(s): | Maciel, Eduarda de Souza |
| Advisor: | Kelly, Luiz Fernando Carvalho |
| Abstract: | A Acanthamoeba castellanii é uma ameba de vida livre comumente encontrada em diversos ambientes como solo e reservatórios de água potável. A Acanthamoeba apresenta duas formas em seu ciclo de vida, os trofozoítos e os cistos. O trofozoíto é sua forma proliferativa, infectiva e o cisto sua forma de resistência, que possui duas paredes celulares que conferem proteção a diferentes estresses. A ecto-3’-nucleotidase é uma ectoenzima, dessa forma encontra-se associada à membrana plasmática com seu sítio catalítico voltado para o meio extracelular. A ecto-3’-nucleotidase é uma enzima bifuncional, atua como nucleotidase sendo capaz de hidrolisar nucleotídeos 3'-monofosforilados, e como nuclease, hidrolisando ácidos nucleicos. Tem papel fundamental não só no processo de nutrição de diferentes parasitas, mas nos processos de adesão, proliferação e interação com células hospedeiras. O presente trabalho tem como objetivo realizar análises que contribuam para caracterização bioquímica da atividade 3’-nucleotidásica em A. castellanii, sendo a primeira caracterização da ecto-3’-nucleotidase em uma ameba de vida livre. Os trofozoítos apresentam uma atividade 3’-nucleotidásica muito superior à forma de vida cística. Dentre os substratos fosforilados, 3’-AMP, 5’-AMP, ATP, ADP, p-NPP e β-GP, o trofozoíto de A. castellanii hidrolisa de forma preferencial o 3’-AMP, que tem uma hidrólise notavelmente superior aos demais. A atividade 3’-nucleotidásica está presente exclusivamente na superfície da membrana plasmática, não apresentando alteração na atividade sendo ela realizada com a célula íntegra ou lisada. A atividade aumenta de forma linear em função do tempo e da densidade celular. A ecto-3’-nucleotidásica apresenta uma cinética de Michaelis-Menten com valores de K m = 0,457±0,039 mM de 3’-AMP e Vmáx = 154±3,240 nmol Pi x h-1 x 10-6 células. A atividade da 3’-nucleotidase é inibida por dithiothreitol (DTT) de forma dose-dependente. Além disso, o DTT só é capaz de modular a hidrólise de 3’-AMP nos trofozoítos de A. castellanii. |
| Keywords: | Acanthamoeba castellanii Enzimas Nucleotidase |
| Subject CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA::BIOLOGIA E FISIOLOGIA DOS MICROORGANISMOS |
| Production unit: | Campus Duque de Caxias Professor Geraldo Cidade |
| Publisher: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
| Issue Date: | 5-Sep-2023 |
| Publisher country: | Brasil |
| Language: | por |
| Right access: | Acesso Aberto |
| Citation: | MACIEL, Eduarda de Souza. Identificação de uma atividade 3’- nucleotidásica presente na superfície da ameba de vida livre Acanthamoeba Castellanii e seu possível papel biológico. 2023. 39 f. Trabalho de conclusão de curso (Graduação em Ciências Biológicas - Biotecnologia) - Campus Duque de Caxias Professor Geraldo Cidade, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Duque de Caxias, 2023. |
| Appears in Collections: | Ciências Biológicas - Biotecnologia |
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