Implantação e validação do teste de Ames na UFRJ-Macaé utilizando o método de microssuspensão (teste de Kado)

Sampaio, Thienne Fernandes

Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11422/22231

Type:	Trabalho de conclusão de graduação
Title:	Implantação e validação do teste de Ames na UFRJ-Macaé utilizando o método de microssuspensão (teste de Kado)
Author(s)/Inventor(s):	Sampaio, Thienne Fernandes
Advisor:	Martins, Samantha Monteiro
Abstract:	Com o propósito de garantir a segurança de substâncias com fins terapêuticos a ANVISA preconiza que sejam feitos testes para avaliar o potencial genotóxico das mesmas. Sem estes testes, novos medicamentos não podem ser registrados no país. O Teste de Ames emprega cepas de Salmonella typhimurium que apresentam mutações em vários genes que codificam a enzima responsável pela síntese de histidina, tornando-as dependente desse nutriente. Contudo, na presença de um mutágeno, a mutação que causa dependência de histidina pode ser revertida. A interpretação dos resultados é baseada no número de colônias revertentes após exposição ao mutágeno. Além disso, um sistema de metabolização é incorporado ao teste permitindo a avaliação de substâncias que necessitam de metabolização para exercer seus efeitos. O objetivo deste trabalho foi implantar e validar o Teste de Ames, na UFRJ-Macaé, utilizando a metodologia de microssuspensão (Teste de Kado), incluindo a avaliação do potencial mutagênico de duas chalconas sintéticas (4-dimetilamino-chalcona e 3,4-(metilenodioxy)-chalcona) que apresentam atividades antimicobacteriana e anti-inflamatória. A confecção dos estoques de células, a checagem do genótipo e a validação do Teste de Kado foi feitas de acordo com protocolos descritos na literatura. Uma possível toxicidade das chalconas frente às linhagens TA98 e TA100 foi avaliada por metodologia similar à de antibiogramas. O procedimento de checagem do genótipo demonstrou que após o repique, crescimento e confecção dos estoques de TA 98 e TA 100, as mesmas ainda apresentavam auxotrofia para histidina, permeabilidade ao cristal violeta, dependência de biotina e resistência a ampicilina. Quanto a validação do Teste de Kado, para as duas linhagens estudadas, o índice de mutagenicidade mostrou valor ≥ 2 em várias doses testadas, confirmando a genotoxicidade das amostras utilizadas na validação do ensaio. A princípio, as chalconas 4 e 5 não se mostraram tóxicas para as linhagens no ensaio de disco difusão. Contudo, no Teste de Kado, estas chalconas apresentaram toxicidade para a linhagem TA98 na ausência e na presença do sistema de metabolização, não permitindo a observação de um possível efeito genotóxico. O ensaio com a TA100 sugere que, na presença do sistema de metabolização, as chalconas 4 e 5 não apresentam um efeito mutagênico (índice de mutagenicidade < 2), o que deverá ser comprovado futuramente no ensaio com outras linhagens testadoras de Salmonella typhimurium.
Keywords:	Testes de mutagenicidade Testes de toxicidade Química farmacêutica Avaliação de medicamentos Mutagenicity tests Toxicity tests Chemistry, pharmaceutical Drug evaluation
Subject CNPq:	CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA
Production unit:	Instituto de Ciências Farmacêuticas
Publisher:	Universidade Federal do Rio de Janeiro
Issue Date:	2015
Publisher country:	Brasil
Language:	por
Right access:	Acesso Aberto
Citation:	SAMPAIO, Thienne Fernandes. Implantação e validação do teste de Ames na UFRJ-Macaé utilizando o método de microssuspensão (teste de Kado). 2015. 72 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Farmácia) - Colegiado de Ensino de Graduação - Macaé, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Macaé, 2015.
Appears in Collections:	Farmácia

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