Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11422/1670
Type: Patente
Title: Método para clonagem, expressão e purificação do polipeptídeo amilóide das ilhotas pancreáticas humanas
Depositor/Holder: Universidade Federal do Rio de Janeiro
Author(s)/Inventor(s): Lopes, Dahabada Helena José
Ferreira, Sérgio Teixeira
Sogayar, Mari Cleide
Degaki, Theri Leica
Colin, Christian
Abstract: Método para clonagem e expressão do polipeptídeo das ilhotas pancreáticas (IAPP) maduro humano sob a forma recombinante, utilizando um sistema de expressão heteróloga em Escherichia coli baseado no promotor Lacl-T7 RNA polimerase, no qual um fragmento de DNA que contém a seqüência que codifica o peptídeo maduro de IAPP é amplificado por transcrição reversa e reação em cadeia da DNA polimerase (RT-PCR) a partir de RNA total derivado de ilhotas pancreáticas humanas, clonado em vetor de expressão como descrito acima e expresso em bactérias, e método de purificação empregando-se as etapas de lise das células, centrifugação do meio e resuspensão do precipitado em presença de agente desnaturante, centrifugação da solução, remoção do material insolúvel, coleta e filtração do sobrenadante clarificado, ligação da proteína a coluna de afinidade contendo íons metálicos imobilizados, clivagem com protease e eluição da rh-lAPP em forma purificada.
Keywords: Polipeptídeo Amilóide das Ilhotas Pancreáticas
clonagem
Subject CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS
Department : Instituto de Bioquímica Médica
Submitted Date: 23-Mar-2004
Issue Date: 1-Nov-2005
Publisher country: Brasil
Language: por
Right access: Acesso Aberto
Patent number: PI 0400735-2 A2
URI: http://hdl.handle.net/11422/1670
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