Método para clonagem, expressão e purificação do polipeptídeo amilóide das ilhotas pancreáticas humanas

Degaki, Theri Leica; Ferreira, Sérgio Teixeira; Lopes, Dahabada Helena José; Sogayar, Mari Cleide; Colin, Christian

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			http://hdl.handle.net/11422/1670

Type:	Patente
Title:	Método para clonagem, expressão e purificação do polipeptídeo amilóide das ilhotas pancreáticas humanas
Depositor/Holder:	Universidade Federal do Rio de Janeiro
Author(s)/Inventor(s):	Lopes, Dahabada Helena José Ferreira, Sérgio Teixeira Sogayar, Mari Cleide Degaki, Theri Leica Colin, Christian
Abstract:	Método para clonagem e expressão do polipeptídeo das ilhotas pancreáticas (IAPP) maduro humano sob a forma recombinante, utilizando um sistema de expressão heteróloga em Escherichia coli baseado no promotor Lacl-T7 RNA polimerase, no qual um fragmento de DNA que contém a seqüência que codifica o peptídeo maduro de IAPP é amplificado por transcrição reversa e reação em cadeia da DNA polimerase (RT-PCR) a partir de RNA total derivado de ilhotas pancreáticas humanas, clonado em vetor de expressão como descrito acima e expresso em bactérias, e método de purificação empregando-se as etapas de lise das células, centrifugação do meio e resuspensão do precipitado em presença de agente desnaturante, centrifugação da solução, remoção do material insolúvel, coleta e filtração do sobrenadante clarificado, ligação da proteína a coluna de afinidade contendo íons metálicos imobilizados, clivagem com protease e eluição da rh-lAPP em forma purificada.
Keywords:	Polipeptídeo Amilóide das Ilhotas Pancreáticas clonagem
Subject CNPq:	CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS
Production unit:	Instituto de Bioquímica Médica
Submitted Date:	23-Mar-2004
Issue Date:	1-Nov-2005
Publisher country:	Brasil
Language:	por
Right access:	Acesso Aberto
Patent number:	PI 0400735-2 A2
Appears in Collections:	Patentes

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