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http://hdl.handle.net/11422/1670
Type: | Patente |
Title: | Método para clonagem, expressão e purificação do polipeptídeo amilóide das ilhotas pancreáticas humanas |
Depositor/Holder: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
Author(s)/Inventor(s): | Lopes, Dahabada Helena José Ferreira, Sérgio Teixeira Sogayar, Mari Cleide Degaki, Theri Leica Colin, Christian |
Abstract: | Método para clonagem e expressão do polipeptídeo das ilhotas pancreáticas (IAPP) maduro humano sob a forma recombinante, utilizando um sistema de expressão heteróloga em Escherichia coli baseado no promotor Lacl-T7 RNA polimerase, no qual um fragmento de DNA que contém a seqüência que codifica o peptídeo maduro de IAPP é amplificado por transcrição reversa e reação em cadeia da DNA polimerase (RT-PCR) a partir de RNA total derivado de ilhotas pancreáticas humanas, clonado em vetor de expressão como descrito acima e expresso em bactérias, e método de purificação empregando-se as etapas de lise das células, centrifugação do meio e resuspensão do precipitado em presença de agente desnaturante, centrifugação da solução, remoção do material insolúvel, coleta e filtração do sobrenadante clarificado, ligação da proteína a coluna de afinidade contendo íons metálicos imobilizados, clivagem com protease e eluição da rh-lAPP em forma purificada. |
Keywords: | Polipeptídeo Amilóide das Ilhotas Pancreáticas clonagem |
Subject CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS |
Production unit: | Instituto de Bioquímica Médica |
Submitted Date: | 23-Mar-2004 |
Issue Date: | 1-Nov-2005 |
Publisher country: | Brasil |
Language: | por |
Right access: | Acesso Aberto |
Patent number: | PI 0400735-2 A2 |
Appears in Collections: | Patentes |
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