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http://hdl.handle.net/11422/1670
Tipo: | Patente |
Título: | Método para clonagem, expressão e purificação do polipeptídeo amilóide das ilhotas pancreáticas humanas |
Depositante/Titular: | Universidade Federal do Rio de Janeiro |
Autor(es)/Inventor(es): | Lopes, Dahabada Helena José Ferreira, Sérgio Teixeira Sogayar, Mari Cleide Degaki, Theri Leica Colin, Christian |
Resumo: | Método para clonagem e expressão do polipeptídeo das ilhotas pancreáticas (IAPP) maduro humano sob a forma recombinante, utilizando um sistema de expressão heteróloga em Escherichia coli baseado no promotor Lacl-T7 RNA polimerase, no qual um fragmento de DNA que contém a seqüência que codifica o peptídeo maduro de IAPP é amplificado por transcrição reversa e reação em cadeia da DNA polimerase (RT-PCR) a partir de RNA total derivado de ilhotas pancreáticas humanas, clonado em vetor de expressão como descrito acima e expresso em bactérias, e método de purificação empregando-se as etapas de lise das células, centrifugação do meio e resuspensão do precipitado em presença de agente desnaturante, centrifugação da solução, remoção do material insolúvel, coleta e filtração do sobrenadante clarificado, ligação da proteína a coluna de afinidade contendo íons metálicos imobilizados, clivagem com protease e eluição da rh-lAPP em forma purificada. |
Palavras-chave: | Polipeptídeo Amilóide das Ilhotas Pancreáticas clonagem |
Assunto CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS |
Unidade produtora: | Instituto de Bioquímica Médica |
Data de depósito: | 23-Mar-2004 |
Data de publicação: | 1-Nov-2005 |
País de publicação: | Brasil |
Idioma da publicação: | por |
Tipo de acesso: | Acesso Aberto |
Número de Patente: | PI 0400735-2 A2 |
Aparece nas coleções: | Patentes |
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Arquivo | Descrição | Tamanho | Formato | |
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