Sensibilização alérgica in vivo como estratégia experimental de otimização do protocolo convencional in vitro de diferenciação eosinofílica: impacto na produtividade

Garcia, Vitória Fernanda do Rosário

Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11422/17480

Full metadata record

DC Field	Value	Language
dc.contributor.advisor	Melo, Christianne Bandeira de	-
dc.contributor.author	Garcia, Vitória Fernanda do Rosário	-
dc.date.accessioned	2022-07-01T15:00:05Z	-
dc.date.available	2023-12-21T03:09:02Z	-
dc.date.issued	2022-03-11	-
dc.identifier.citation	GARCIA, V. F. do R. (2022). Sensibilização alérgica in vivo como estratégia experimental de otimização do protocolo convencional in vitro de diferenciação eosinofílica: impacto na produtividade [Trabalho de Conclusão de Curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon.	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/11422/17480	-
dc.language	por	pt_BR
dc.publisher	Universidade Federal do Rio de Janeiro	pt_BR
dc.rights	Acesso Aberto	pt_BR
dc.subject	Eosinófilos	pt_BR
dc.subject	Células-tronco embrionárias murinas	pt_BR
dc.subject	Eosinofilia	pt_BR
dc.subject	Eosinophils	pt_BR
dc.subject	Mouse embryonic stem cells	pt_BR
dc.subject	Eosinophilia	pt_BR
dc.title	Sensibilização alérgica in vivo como estratégia experimental de otimização do protocolo convencional in vitro de diferenciação eosinofílica: impacto na produtividade	pt_BR
dc.type	Trabalho de conclusão de graduação	pt_BR
dc.contributor.authorLattes	http://lattes.cnpq.br/5848567739632430	pt_BR
dc.contributor.advisorCo1	Tasmo, Natália Recardo Amorim	-
dc.contributor.referee1	Matos, Herbert Leonel de	-
dc.contributor.referee2	Pão, Camila Ribeiro Rodrigues	-
dc.contributor.referee3	Santos, Fábio Pereira Mesquita dos	-
dc.contributor.referee4	Filardy, Alessandra D'Almeida	-
dc.description.resumo	Eosinófilos apresentam desde funções citotóxicas efetoras em infecções helmínticas e reações alérgicas, quanto funções imunomodulatórias essenciais à homeostasia de tecidos como o gastrointestinal, adiposo e mamário. Estudos in vitro empregando eosinófilos murinos são essenciais para avançar na compreensão funcional desta célula. O protocolo de obtenção de eosinófilos murinos mais empregado atualmente é o descrito por Dyer e colaboradores (2008), permitindo obter ao final de 14 dias de cultura eosinófilos maduros com mais de 90% de pureza (fase inicial de proliferação de precursores induzida por SCF e FLT3-L, seguida de indução de diferenciação por IL-5). Embora eficiente, o protocolo ainda exibe limitações como o alto custo versus produtividade e a qualidade das células produzidas. Como estratégia de otimização, estudamos ajustes do protocolo padrão baseado no emprego de células de medula óssea de camundongos pré-sensibilizados com ovalbumina (modelo de inflamação alérgica), que hipotetizamos apresentar microambiente medular já pró-eosinopoiético. Para validar a existência deste microambiente pró-eosinopoiético, avaliamos, inicialmente, se a sensibilização alérgica induz eosinofilia medular e/ou alteração dos níveis medulares de mediadores próeosinopoiéticos. Nossos dados mostram que houve aumento da eosinofilia medular em animais sensibilizados quando comparados aos animais “naive”. Mais ainda, observamos elevação discreta dos níveis das citocinas IL-3, IL-5 e dos eicosanóides CysLTs e PGD2 (dosados por ELISA e EIA, respectivamente) no lavado medular dos animais BALB/c sensibilizados; indicando que a sensibilização de fato induziu instalação de microambiente medular próeosinopoiético in vivo. A sensibilização também promoveu alterações no protocolo in vitro de produção de eosinófilos, incluindo: (i) aumento nos números de eosinófilos ao final da fase inicial de proliferação (8 dias de cultura) nas culturas provenientes de animais sensibilizados; (ii) no 8º dia de cultura iniciada com células medulares de animal BALB/c sensibilizado, foi detectado intenso aumento na concentração de IL-3 no sobrenadante da cultura em comparação aos níveis de IL-3 encontrados nas culturas iniciadas com células medulares de camundongos BALB/c “naives”; e (iii) aos 14 dias de cultura, a produção total de eosinófilos mostrou-se aumentada nas culturas iniciadas a partir de animais sensibilizados. Nossos dados confirmam nossa hipótese de que a sensibilização alérgica in vivo de animais BALB/c corresponde à estratégia de baixo custo para otimização do protocolo de obtenção de eosinófilos murinos visando estudos funcionais in vitro.	pt_BR
dc.publisher.country	Brasil	pt_BR
dc.publisher.department	Instituto de Microbiologia Paulo de Góes	pt_BR
dc.publisher.initials	UFRJ	pt_BR
dc.subject.cnpq	CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA	pt_BR
dc.subject.cnpq	CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA	pt_BR
dc.embargo.terms	aberto	pt_BR
Appears in Collections:	Ciências Biológicas - Microbiologia e Imunologia

Files in This Item:

File	Description	Size	Format
VFRGarcia.pdf		1.35 MB	Adobe PDF	View/Open

Show simple item record Recommend this item View Statistics

Pantheon Institutional repository