Otimização upstream da produção de L-asparaginase recombinante em E. Coli para o tratamento de leucemia linfoblástica aguda

Ferreira, Gabriela de Assis

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			http://hdl.handle.net/11422/25692

Type:	Trabalho de conclusão de graduação
Title:	Otimização upstream da produção de L-asparaginase recombinante em E. Coli para o tratamento de leucemia linfoblástica aguda
Author(s)/Inventor(s):	Ferreira, Gabriela de Assis
Advisor:	Ramón Hernández, José Angel
Co-advisor:	Garcia, Mariana Miguez Tardelli
Co-advisor:	Aquino, Carolina Lessa
Abstract:	Buscando eficiência, a indústria de bioprocessos tem investido na otimização ao longo da cadeia produtiva. A abordagem mais utilizada se baseia na análise de uma variável por vez, aumentando o custo e tempo investidos. Através da técnica Plackett-Burman é possível estudar um amplo número de variáveis em um número reduzido de experimentos, realizando uma seleção prévia das variáveis que influenciam o processo. Um medicamento frequentemente utilizado no tratamento da leucemia linfoblástica aguda (LLA) é a L-asparaginase, cuja maior parte das formulações no mercado tem origem bacteriana. Essa enzima degrada o excesso de L-asparagina no meio, inibindo a proliferação das células tumorais da LLA. Rotas alternativas envolvem o uso da enzima L-asparaginase humana (hASRGL1) em Escherichia coli recombinante, no entanto, a baixa atividade catalítica dificulta a produção industrial devido ao alto custo de revenda do medicamento.. O objetivo deste estudo foi definir as variáveis que exercem maior impacto na etapa upstream da produção de L-asparaginase recombinante. Com a matriz ortogonal de Plackett-Burman fornecida pela empresa Protimiza, foi possível realizar 20 ensaios para avaliar 13 parâmetros. A análise da cinética de crescimento e atividade enzimática após a indução da cepa revelou que o tempo de 10 horas apresenta a maior atividade enzimática (14,75 UI/mL). Optou-se pelo tempo de 8 horas de indução, próximo ao final da fase exponencial da E. coli recombinante. O gráfico de Pareto obtido indica que 4 variáveis (temperatura, concentração de triptona, densidade óptica (D.O.) de indução e inóculo) impactam significativamente o crescimento celular. Esses dados podem ser usados para construir um modelo preditivo visando maximizar a expressão celular.
Keywords:	Otimização de processos Indústria de bioprocessos Leucemia-linfoma linfoblástico de células T precursoras
Subject CNPq:	CNPQ::ENGENHARIAS::ENGENHARIA QUIMICA::TECNOLOGIA QUIMICA::MEDICAMENTOS
Production unit:	Escola de Química
Publisher:	Universidade Federal do Rio de Janeiro
Issue Date:	11-Jul-2024
Publisher country:	Brasil
Language:	por
Right access:	Acesso Aberto
Citation:	FERREIRA, Gabriela de Assis. Otimização upstream da produção de L-asparaginase recombinante em E. Coli para o tratamento de leucemia linfoblástica aguda. 2024. 76 f. TCC (Graduação) - Curso de Engenharia de Bioprocessos, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, 2024.
Appears in Collections:	Engenharia de Bioprocessos

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