Desenvolvimento de protocolo para a expressão heteróloga de proteínas: clonagem e sequenciamento da região codificante de proteína ligadora de odor de antena de Rhodnius prolixus

Brito, Nathália Faro

Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11422/5610

Full metadata record

DC Field	Value	Language
dc.contributor.advisor	Melo, Ana Claudia do Amaral	-
dc.contributor.author	Brito, Nathália Faro	-
dc.date.accessioned	2018-11-02T00:36:15Z	-
dc.date.available	2023-12-21T03:05:11Z	-
dc.date.issued	2013-12-12	-
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/11422/5610	-
dc.language	por	pt_BR
dc.publisher	Universidade Federal do Rio de Janeiro	pt_BR
dc.rights	Acesso Aberto	pt_BR
dc.subject	Rhodnius prolixus	pt_BR
dc.subject	Clonagem	pt_BR
dc.subject	Doença de Chagas	pt_BR
dc.title	Desenvolvimento de protocolo para a expressão heteróloga de proteínas: clonagem e sequenciamento da região codificante de proteína ligadora de odor de antena de Rhodnius prolixus	pt_BR
dc.type	Trabalho de conclusão de graduação	pt_BR
dc.contributor.advisorLattes	http://lattes.cnpq.br/8817420732602033	pt_BR
dc.contributor.authorLattes	http://lattes.cnpq.br/0530136845968253	pt_BR
dc.contributor.advisorCo1	Pinheiro, Anderson de Sá	-
dc.contributor.advisorCo1Lattes	http://lattes.cnpq.br/3773354236475553	pt_BR
dc.contributor.referee1	Silva, Márcia Regina Soares da	-
dc.contributor.referee1Lattes	http://lattes.cnpq.br/4013478821696320	pt_BR
dc.contributor.referee2	Teixeira, Viviane Gomes	-
dc.contributor.referee2Lattes	http://lattes.cnpq.br/1229963402809254	pt_BR
dc.description.resumo	A doença de Chagas, também conhecida como tripanossomíase americana, é uma infecção crônica e debilitante, frequentemente fatal, que afeta atualmente milhões de pessoas da América Latina. Causado pelo protozoário Trypanosoma cruzi, o mal de Chagas é transmitido principalmente por insetos da subfamília Triatominae, conhecidos popularmente como barbeiros. A olfação é uma das modalidades sensoriais que permite aos insetos interpretar o meio ambiente. Diversas proteínas participam desse processo, dentre as quais as mais importantes são as proteínas ligadoras de odor, denominadas OBPs. O objetivo deste estudo foi estabelecer um protocolo inicial para a expressão heteróloga de proteínas ligadoras de odor (OBPs) de antena de Rhodnius prolixus. Com o auxílio de ferramentas de bioinformática, foram selecionadas algumas OBPs no transcriptoma do R. prolixus, cujas sequências de nucleotídeos foram utilizadas como base para desenhar oligossacarídeos iniciadores necessários para as reações de amplificação. Inicialmente, o RNA total foi extraído de 50 pares de antenas, tratado com RNAse e usado para sintetizar cDNA . A amplificação das regiões de interesse do cDNA foi feita por reação em cadeia da polimerase, utilizando os oligonucleotídeos iniciadores desenhados especificamente para cada OBP, com posterior análise e purificação dos produtos de PCR por eletroforese em gel de agarose 1%. Essa região foi ligada em vetor de clonagem pGEM T Easy e inserida por meio de transformação química em células de Escherichia coli. O DNA plasmidial foi purificado e, após sequenciamento, foi confirmada a presença de um inserto cuja sequência apresentou um alto grau (99%) de similaridade com a proteína ligadora de odor estudada. O entendimento de características de proteínas envolvidas no sistema olfativo de R. prolixus é de grande importância no desenvolvimento de novas formas de controle vetorial que sejam específicas para esse inseto, na tentativa de minimizar qualquer tipo de agressão a outras espécies ou ao meio ambiente.	pt_BR
dc.publisher.country	Brasil	pt_BR
dc.publisher.department	Instituto de Química	pt_BR
dc.publisher.initials	UFRJ	pt_BR
dc.subject.cnpq	CNPQ::CIENCIAS EXATAS E DA TERRA::QUIMICA	pt_BR
dc.embargo.terms	aberto	pt_BR
Appears in Collections:	Química

Files in This Item:

File	Description	Size	Format
NFBrito.pdf		882.38 kB	Adobe PDF	View/Open

Show simple item record Recommend this item View Statistics

Pantheon Institutional repository