Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: http://hdl.handle.net/11422/20437
Especie: Trabalho de conclusão de graduação
Título : Caracterização de lipases de mamona (Ricinus communis) expressas em Pichia pastoris
Autor(es)/Inventor(es): Massaglia, Luca
Campos, Gabriel Mendes
Tutor: Almeida, Rodrigo Volcan
Tutor : Brêda, Gabriela Coelho
Tutor: Itabaiana Junior, Ivaldo
Resumen: Previamente, o nosso grupo de pesquisa clonou em Pichia pastoris duas lipases presentes na membrana de corpúsculos lipídicos da semente de Ricinus communis, denominadas RcOBL1 e RcATGL, gerando uma biblioteca de 20 recombinantes com 10 para cada lipase. Nesse contexto, o presente trabalho se inseriu na produção e caracterização dos extratos brutos dos sobrenadantes dos cultivos dos recombinantes contendo as lipases de interesse. A partir da biblioteca gerada, duas cepas foram selecionadas, uma para cada lipase, em que os meios de cultura, devido a expressão extracelular, apresentaram maior atividade hidrolítica no éster 4-metilumbeliferil heptanoato (MUF-7), alcançando valores de atividade de 148,0 U/L e 132,8 U/L para RcOBL1 e RcATGL, respectivamente, em cultivo em frascos agitados. Dois métodos de concentração do meio de cultura, liofilização e salting out, foram viáveis para as amostras contendo as lipases estudadas, acarretando um aumento de atividade entre 111 e 198,5%. Através da caracterização, foi determinado que ambas as lipases apresentaram melhor atividade em temperaturas acima de 50 °C e pH em torno de 5, além de uma preferência por substratos de cadeia média e uma boa estabilidade ao congelamento. O extrato bruto concentrado, no entanto, não foi capaz de hidrolisar tributirina e óleos vegetais, o que pode ser explicado pela baixa produção das lipases de interesse, conforme observado em eletroforese em gel de poliacrilamida.
Materia: Lipase
Semente de mamona
Pichia pastoris
Materia CNPq: CNPQ::ENGENHARIAS::ENGENHARIA QUIMICA::TECNOLOGIA QUIMICA
Unidade de producción: Escola de Química
Editor: Universidade Federal do Rio de Janeiro
Fecha de publicación: 16-feb-2023
País de edición : Brasil
Idioma de publicación: por
Tipo de acceso : Acesso Aberto
Aparece en las colecciones: Engenharia de Bioprocessos

Ficheros en este ítem:
Fichero Descripción Tamaño Formato  
LMassaglia.pdf570.54 kBAdobe PDFVisualizar/Abrir


Los ítems de DSpace están protegidos por copyright, con todos los derechos reservados, a menos que se indique lo contrario.